Characterization of α-L-arabinofuranosidase (abfA) Gene from Bacillus subtilis J1
| Main Authors: | Putri, Nani Aisyah, Dr. Yo-Chia Chen, -, Professor Dr. Ir. Joni Kusnadi, - |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed Book |
| Bahasa: | eng |
| Terbitan: |
, 2020
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.ub.ac.id/id/eprint/192377/1/0420100011-Nani%20Aisyah%20Putri.pdf http://repository.ub.ac.id/id/eprint/192377/ |
Daftar Isi:
- Degradasi dinding sel tumbuhan memerlukan tindakan beberapa aktivitas enzim. -L-arabinofuranosidase (AbfA) menampilkan kemampuan sebagai enzim debranching untuk mendegradasi hemiselulosa dari limbah pertanian. Ini enzim bekerja secara sinergis dengan xilanase dan xylosidase untuk memotong sisi rantai arabinofuranose pada xilan. Bacillus subtilis merupakan salah satu bakteri yang mampu menghasilkan AbfA, tetapi aktivitas enzim ini tetap sulit dipahami dan perlu dipelajari secara mendalam. Produksi enzim rekombinan oleh memanfaatkan E. coli adalah cara yang menjanjikan untuk memproduksi dan mengkarakterisasi B. subtilis J1 AbfA. AbfA diklon dari genom B. subtilis J1 dan diligasi pada plasmid pET21a(+). E. coli BL21 (DE3) digunakan untuk memproduksi dan mengkarakterisasi kondisi optimum isopropil -D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) induksi dengan penambahan mineral untuk meningkatkan kelarutannya. Enzim ini optimal kondisi dalam buffer asam sitrat pH 6,5 pada 35 C. Itu stabil dalam pH yang luas berkisar 5-8 dan tidak aktif pada suhu di atas 55 °C. Enzim memiliki berat molekul sekitar 59,7 kDa. Enzim ini aktif melawan para-nitrofenil-α-L-arabinofuranoside (pNPA), arabinoxylan dan arabinan substrat, dan enzim campuran AbfA dengan Xilanase telah meningkatkan gula pereduksi dalam substrat arabinoxylan dan xilan