KAJIAN ENZIM KITINASE TERMOSTABIL DARI BAKTERI TERMOFIL: PRODUKSI, PEMURNIAN, KARAKTERISASI, DAN APLIKASI DALAM HIDROLISIS KITIN

Main Author: Natsir, Hasnah
Format: Article
Terbitan: , 2012
Subjects:
Online Access: http://repository.unhas.ac.id/handle/123456789/1248
Daftar Isi:
  • HASNAH NATSIR. Kajian Enzim Kitinase Termostabil dari Bakteri Termofil: Produksi, Pemurnian, Karakterisasi, dan Aplikasi dalam Hidrolisis Kitin (dibimbing oleh Abd. Rauf Patong, Maggy T. Suhartono dan Ahyar Ahmad) Penelitian ini bertujuan untuk 1) mengetahui spesies bakteri termofil terpilih, 2) memurnikan kitinase melalui kromatografi interaksi hidrofobik dan filtrasi gel 3) mengarakterisasi sifat biokimia kitinase, dan 4) mengaplikasikan kitinase dalam hidrolisis kitin pada dinding sel jamur Ganoderma sp. dan sebagai biokatalisator dalam hidrolisis kitin dari limbah udang. Penelitian ini dilakukan melalui tahapan isolasi, skrining, dan identifikasi bakteri termofil. Setelah itu, dilakukan optimasi produksi kitinase. Enzim kitinase dimurnikan melalui pengendapan dengan ammonium sulfat, dialisis, kromatografi intreraksi hidrofobik, dan filtrasi gel. Kitinase murni dikarak-terisasi sifat biokimianya. Selanjutnya, kitinase murni yang dihasilkan di-aplikasikan dalam hidrolisis kitin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa bakteri termofil terpilih isolat HSA3-1a berpotensi menghasilkan kitinase termostabil dan diidentifikasi sebagai Bacillus licheniformis. Kitinase ini diproduksi maksimum pada konsentrasi koloidal kitin 0,5% dengan waktu fermentasi 72 jam. Kitinase murni (fraksi 29) diperoleh melalui pengendapan dengan amonium sulfat 60???70%, dialisis, fraksinasi dengan butil sefarosa FF dan sefadeks G-75. Kitinase murni tersebut memunyai tingkat kemurnian 33 kali lipat dari enzim ekstrak kasar dan berat molekulnya sekitar 79 kDa. Aktivitas kitinase maksimum pada kondisi pH 7,0; suhu 60oC; konsentrasi substrat 0,3%. Kitinase aktif dan stabil selama tiga jam dengan penambahan ion Ca2+ 1 mM. Kitinase ini dapat menghidrolisis kitin pada dinding sel jamur Ganoderma sp. dan kitin dari limbah udang.