Upaya Peningkatan Solubilitas Protein Rekombinan Ag 38 Kda Mycobacterium Tuberculosis Dengan Metode Heat Shock
| Main Author: | Sulistyarini, Arum |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed |
| Terbitan: |
, 2017
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.ub.ac.id/8052/ |
Daftar Isi:
- Antigen 38 (Ag38) merupakan agen virulensi yang dipercaya paling poten menyebabkan dan meningkatkan keparahan tuberkulosis (TB). Gen pab pengkode Ag38 telah diisolasi dan diekspresikan dalam E.coli. Namun, saat protein rekombinan ini diekspresikan, banyak terbentuk protein dalam bentuk yang tidak larut, yang disebabkan terbentuknya badan inklusi (inclusion bodies). Oleh karena itu diperlukan suatu metode yang dapat meningkatkan kelarutan protein sehingga didapatkan protein yang lebih fungsional. Salah satu metode yang dapat meningkatkan kelarutan protein adalah metode heat shock. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah metode heat shock dapat meningkatkan solubilitas protein antigen 38 kDa M. tuberculosis. Metode heat shock dilakukan dengan memapar sel protein terhadap stress panas (heat stress) yang akan memicu ekspresi dari protein heat shock, yang berperan dalam membantu proses refolding, membongkar agregat protein, atau mencegah terbentuknya agregasi protein. Profil protein dengan metode heat shock yang ditunjukkan dari hasil elektroforesis SDS PAGE menunjukkan banyak protein yang berada di pellet, sedangkan yang berada di supernatant hanya sedikit. Artinya bahwa sedikit protein rekombinan yang meningkat kelarutannya. Untuk mendapat protein rekombinan Ag38 kDa murni, dilakukan purifikasi dengan Protino Ni-TED. Kesimpulan dari penelitian ini menunjukkan bahwa metode heat shock tidak bisa membantu meningkatkan kelarutan protein rekombinan Ag38 kDa Mycobacterium tuberculosis.