ANALISIS MOLEKULER DAN HISTOKIMIA TANAMAN JARAK PAGAR (Jatropha curcas. L) TRANSGENIK DENGAN PENANDA TOLERANSI TERHADAP ANTIBIOTIK HIGROMISIN
| Main Author: | FAHLEVI, ROBBY WAHYU |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed |
| Terbitan: |
, 2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://eprints.umm.ac.id/15131/ |
Daftar Isi:
- Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis dan mengevaluasi secara molekuler dan histokimia tanaman jarak pagar (Jatropha curcas L.) transgenik yang telah ditransformasi gen melalui plasmid vektor pCambia 1304 dengan pembawa gen penanda toleransi terhadap antibiotik higromisin (gen hpt). Penelitian dilaksanakan di Laboraturium Molekuler Pusat Pengembangan Bioteknologi Universitas Muhammadiyah Malang. Percobaan analisis dilakukan secara molekuler untuk menganalisis integrasi gen penanda hpt pada tanaman jarak pagar transgenik menggunakan teknik PCR (Polymerase Chain Reaction), dengan sekuens primer gen penanda hpt yakni 5Â’ CAC AAT CCC ACT ATC CTT CGC 3’ dan 5’ GCA GTT CGG TTT CAG GCA GGT 3’, maupun analisis secara histokimia yang dilakukan untuk menganalisis ekspresi toleransi gen penanda hpt terhadap antibiotik higromisin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa percobaan analisis secara molekuler diperoleh 5 nomor tanaman jarak pagar 25 yang menunjukkan integrasi positif gen penanda hpt yakni TR-21, TR-22, TR-23, TR-24, dan TR-, sedangkan analisis secara histokimia diperoleh beberapa nomor tanaman yang menunjukkan ekspresi positif gen penanda hpt, namun tidak menunjukkan integrasi positif gen penanda hpt pada analisis molekulernya. Hal ini disebabkan oleh beberapa faktor diantaranya yakni tingkat ekspresi transformasi gen yang rendah, posisi integrasi gen dalam genom tanaman yang kosong atau terpotong, konsentrasi antibiotik yang belum tepat, adanya cekaman lingkungan, serta fenomena gene silencing.