ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI INDIGEN PENGHASIL KERATINASE DARI TANAH DESA BUNULREJO MALANG SERTA UJI POTENSINYA DALAM MENDEGRADASI BULU AYAM
| Main Author: | HIZKIA PUTRAASA |
|---|---|
| Format: | PeerReviewed eJournal |
| Bahasa: | ind |
| Terbitan: |
SKRIPSI Jurusan Kimia - Fakultas MIPA UM
, 2016
|
| Online Access: |
http://karya-ilmiah.um.ac.id/index.php/kimia/article/view/52731 |
Daftar Isi:
- ABSTRACT Hizkia Putraasa. 2015. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Indigen Penghasil Keratinase dari Tanah Desa Bunulrejo Malang serta Uji Potensinya dalam Mendegradasi Bulu Ayam. Skripsi, Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Malang. Pembimbing: (I) Dr. Suharti, S.Pd, M.Si, (II) Eli Hendrik Sanjaya, S.Si, M.Si Kata Kunci: Bulu , Keratin, Keratinase.Komponen utama bulu ayam adalah keratin. Keratin merupakan protein serat yang bersifat sangat hidrofobik dan mempunyai struktur yang sangat stabil. Stabilitas keratin disebabkan karena adanya ikatan disulfida dalam jumlah yang banyak. Enzim keratinase diketahui dapat mendegradasi keratin menjadi asam amino-asam amino dan polipeptida pendek. Keratinase dapat dihasilkan oleh fungi serta mikroba. Indonesia merupakan negara dengan tingkat keanekaragaman hayati yang tinggi. Potensi keanekaragaman hayati Indonesia memberikan peluang yang besar pada diversitas mikroba penghasil keratinase. Penelitian ini bertujuan untuk: (1) mendapatkan isolat mikroba penghasil keratinase dari tanah Kelurahan Bunulrejo Malang dan (2) mengetahui spesies mikroba yang telah diisolasi dengan identifikasi mikroba secara genotip. Penelitian dilakukan melalui 2 tahapan yaitu, (1) Isolasi bakteri penghasil keratinase serta (2) Identifikasi mikroba secara genotip. Isolat bakteri diambil dari tanah Desa Bunulrejo Malang yang telah diperkaya dengan menambahkan bulu ayam sebagai subtrat keratin. Selanjutnya, isolat mikroba diseleksi pada media selektif susu skim-agar serta di uji potensinya dalam mendegradasi bulu ayam dengan menginkubasi isolat mikroba pada media cair yang berisi bulu ayam. Potensi isolat mikroba dalam mendegradasi bulu ayam dapat diketahui dengan mengukur berat bulu yang tersisa dan penentuan kadar tirosin selama proses degradasi bulu ayam. Identifikasi mikroba secara genotip dilakukan dengan menganalisis urutan asam nukleat dari gen pengkode 16S rRNA.Hasil penelitian menunjukan isolat LH yang diambil dari kelurahan Bunulrejo Malang merupakan bakteri indigenous penghasil keratinase. Hasil pengamatan selama 5 hari menunjukkan bahwa isolat LH dapat mendegradasi bulu ayam dengan persentase bulu sisa mencapai 47,01 % serta menghasilkan kadar tirosin sebesar 72,53 μmol/mL. Identifikasi bakteri indigenous LH secara genotip menunjukkan bahwa isolat LH merupakan bakteri Pseudomonas. Hal ini ditunjukan dengan hasil BLAST pada situs NCBI yang menginformasikan bahwa isolat LH memiliki homologi 99 % dengan 6 galur bakteri pseudomonas. Pohon filogenetik yang berhasil dibuat menunjukkan bahwa isolat LH memiliki kekerabatan yang dekat dengan Pseudomonas Nitroreducens strain IAM 1439. Tetapi isolat bakteri LH bukan merupakan bakteri Pseudomonas Nitroreducens galur IAM 1439 oleh karena tidak memiliki homologi 100 %. Hal ini diduga bahwa isolat bakteri LH merupakan bakteri Pseudomonas Nitroreducents galur baru.ABSTRACT Hizkia Putraasa. 2015. Isolation and Identification of Indigenous Bacteria in Producing Keratinase from District Bunulrejo Malang Soil and Its Potential Study to Degrade Chicken Feathers. Thesis, Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, State University of Malang. Supervisor: (I) Dr. Suharti, S.Pd, M.Si, (II) Eli Hendrik Sanjaya, S.Si, M.Si Keyword : Feather, Keratin, KeratinaseThe main component a chicken feather is keratin. Keratin is highly hydrophobic protein fibers and it has a very stable structure. Keratin stability due to the disulfide bonds in large amounts. Keratinase enzyme known to degrade keratin become amino acids and short polypeptides. Keratinase can be produced by fungi and microbes. Indonesia is a country with a high level of biodiversity. Potential Indonesian biodiversity presents a great opportunity to microbes diversity in the process of producing keratinase. This study aims to: (1) Getting the microbial isolates producing keratinase from District Bunulrejo Malang Soil sample and (2) Knowing the species of microbes that have been isolated by the identification of microbial genotype.The study was conducted through two phases, namely, (1) Isolation of bacterial that producing keratinase (2) Identification of microbial genotype. The bacteria isolate taken from district Bunulrejo Malang that enriched by adding chicken feather as subtrat of keratin. Furthermore, the microbial isolate selected in the media selective milk skim and testing its potential to degrade chicken feather with incubation the microbes isolate in the liquid medium containing chicken feather. The potential of the microbes for degradation chicken feather can be known to measure the weight of chicken feather left and the deterination tirosin levels during the process od degradation chicken feather. Genotypically microbial identification is done by analyzing the nucleic acid sequence of the gene encoding 16S rRNA. The research showed isolates LH who taken from the District Bunulrejo Malang is indigenous bacteria that have been produce keratinase. The result of the observation for 5 days showed that LH isolate could degrade chicken feathers by % weight left was reached 47.01% and to produce tyrosine levels of 72.53 μmol/mL. Identification of indigenous bacteria LH genotype is showed as Pseudomonas Nitroreducens bacteria. It is directed by the results of BLAST on NCBI web site that informs LH isolates has a homology of 99 % with 6 strains of bacteria Pseudomonas. Phylogenetic tree created successfully demonstrated that LH isolates closely related to Pseudomonas Nitroreducens strain IAM 1439. But LH isolates is not bacteria Pseudomonas Nitroreducens strain IAM 1439 because it does not have 100% homology. It suspected bacterial LH isolates is a new strain of the bacterium Pseudomonas Nitroreducents.