SUBKLONING GEN MKAFGluI PENYANDI β-1,3-GLUKANASE DAN EKSPRESI PADA Pichia pastoris
| Main Author: | SRI WAHYUNI |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed Book |
| Bahasa: | ind |
| Terbitan: |
, 2019
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.unair.ac.id/93251/1/MPK.%2058-19%20Wah%20s%20ABSTRAK.pdf http://repository.unair.ac.id/93251/2/MPK.%2058-19%20Wah%20s%20DAFTAR%20ISI.pdf http://repository.unair.ac.id/93251/3/MPK.%2058-19%20Wah%20s%20DAFTAR%20PUSTAKA.pdf http://repository.unair.ac.id/93251/4/MPK.%2058-19%20Wah%20s%20BR.pdf http://repository.unair.ac.id/93251/ https://www.ijphrd.com |
Daftar Isi:
- Wahyuni, S., 2019, Subkloning Gen MKAFGlu1 Penyandi β-1,3-glukanase dan Ekspresi pada Pichia pastoris, Skripsi Dibawah Bimbingan Prof. Dr. Afaf Baktir, M.S., Apt. dan Ali Rohman, M. Si., Ph. D. Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga ABSTRAK Gen MKAFGlu1 bersumber dari metagenom eukariot pada saluran pencernaan Achatina fulica. Gen MKAFGlu1 merupakan penyandi dari enzim β-1,3-glukanase yang dapat menghidrolisis polimer dengan ikatan β-1,3-glikosidik. Enzim β-1,3-glukanase memiliki manfaat di beberapa bidang industri dan medis. Penelitian ini bertujuan untuk mengkonstruksi plasmid rekombinan pPICZαA-MKAFGlu1, mengintegrasikan plasmid pPICZαA-MKAFGlu1 pada genom Pichia pastoris X-33, menentukan fenotip P. pastoris X-33 rekombinan pPICZαA-MKAFGlu1 serta tingkat ekspresi MKAFGlu1 dalam P. pastoris X-33. Konstruksi dilakukan melalui subklon, hasil konstruksi kemudian ditransformasi ke E. coli TOP10 untuk memkloning plasmid rekombinan pPICZαA-MKAFGlu1, selanjutnya plasmid diisolasi dan dilakukan transformasi ke P. pastoris X-33. Dari hasil penelitian konstruksi plasmid rekombinan pPICZαA-MKAFGlu1 berhasil dilakukan dan proses integrasi di dalam genom P. pastoris X-33 telah berhasil. Fenotip dari P. pastoris X-33 rekombinan pPICZαA-MKAFGlu1 pada penelitian ini adalah Mut+. Ekspresi enzim MKAFGlu1 berhasil dilakukan dengan aktivitas yang berbeda ditiap jam, aktivitas tertinggi dari enzim didapatkan pada jam ke- 54 dengan aktivitas sebesar 0,8726 U/ml.