ISOLASI DAN KARAKTERISASI GEN PENYANDI α-AMILASE DARI Anoxybacillus flavithermus TP-01
Daftar Isi:
- Enzim amilase merupakan enzim yang dapat menghidrolisis pati menjadi glukosa. Enzim ini terdiri dari α-amilase, β-amilase, dan γ-amilase. Anoxybacillus flavithermus TP-01 merupakan salah satu bakteri termofilik yang memiliki aktivitas enzim amilolitik yang dapat menghidrolisis zat tepung. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi gen α-amilase dengan teknik PCR. Hasil PCR menunjukkan bahwa gen penyandi α-amilase berhasil diamplifikasi dengan ukuran 1500 bp pada gel elektroforesis agarosa. Kemudian diinsersi ke dalam plasmid pGEX, pengecekan plasmid rekombinan dilakukan dengan restriksi double digest menggunakan enzim EcoRI dan XhoI hasilnya menyatakan bahwa gen α-amilase terinsersi dengan nama plasmid pGEX-Amy selanjutnya, plasmid dikloning ke dalam E.coliTOP10. Transforman dianalisis dengan PCR koloni dan berhasil membuktikan bahwa plasmid rekombinan telah berhasil ditransformasikan ke dalam E.coli TOP10. Keberhasilan kloning ditandai dengan adanya pita dari hasil PCR koloni pada gel elektroforesis dengan ukuran 1500 bp sesuai ukuran dari gen α-amilase.