EKSPRESI α-L-ARABINOFURANOSIDASE Dictyoglomus thermophilum H-6-12 DALAM Escherichia coli, PEMURNIAN, DAN KARAKTERISASINYA
| Main Author: | BERLIANA KUSUMA WARDHANI, 081411531061 |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed Book |
| Bahasa: | ind |
| Terbitan: |
, 2018
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.unair.ac.id/73886/1/KKC%20KK%20MPK%2029%20-%2018%20War%20e-Abstrak.pdf http://repository.unair.ac.id/73886/2/KKC%20KK%20MPK%2029%20-%2018%20War%20e.pdf http://repository.unair.ac.id/73886/ http://lib.unair.ac.id |
Daftar Isi:
- Enzim α-L-arabinofuranosidase merupakan salah satu enzim xilanolitik yang berperan untuk menghidrolisis ujung non-pereduksi arabinosa dengan cara memutus ikatan glikosidik α-L-1,3 pada xilan dan rantai sampingnya. Pada penelitian ini, enzim α-L-arabinofuranosidase yang berasal dari bakteri termofil Dictyoglus thermophillum (Dt-Ara1) dieskpresikan ke dalam sistem ekspresi Escherichia coli BL21-pET-15b. Enzim tersebut terekspresi dengan baik dengan penambahan IPTG 1M sebagai induser. Zat aditif seperti sorbitol, sukrosa, NaCl, dan etanol tidak menunjukkan pengaruh spesifik pada ekspresi Dt-Ara1. Protein rekombinan Dt-Ara1 dimurnikan dengan kromatografi afinitas menggunakan kolom Ni-NTA. Analisis SDS-PAGE menunjukkan pita tunggal yang berarti Dt-Ara1 berhasil dimurnikan. Dt-Ara1 murni menunjukkan aktivitas α-L-arabinofuranosidase dengan penambahan substrat pNP-A dan optimum pada pH 6 dan suhu 90°C dengan aktivitas masing-masing sebesar 4,5 x 104 U. mg-1 dan 5,2 x 105 U. mg-1