Efisiensi Transformasi Agrobacterium Tumefaciens Strain GV3101 untuk Pembentukan Padi (Oryza Sativa l.) Tahan Penggerek Batang Padi Kuning (Scirpophaga Incertulas)
Daftar Isi:
- Penelitian ini bertujuan untuk : 1) mengetahui estimasi efisiensi transformasipCAMBIA5300 cryIAb-cryIAc dengan bantuan Agrobacterium tumefaciens strain GV3101 pada padi varietas Inpari 6, 2) mengetahui pengaruh beberapa kerapatan selbakteri terhadap efisiensi transformasi, 3) mengetahui apakah kalus hasil transformasi telah tersisipi gen fusi cryIAb-cryIAc. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei sampai September 2018 di Laboratorium Biologi Molekuler, Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumber Daya Genetik Pertanian (BB Biogen),Bogor. Variabel pengamatan yang diamati pada penelitian ini meliputi 1) jumlah kaluslolos seleksi pada tahap ketiga seleksi, jumlah kalus dengan green spot yang terbentukpada tahap pra-regenerasi, jumlah kalus beregenerasi, dan jumlah planlet yang terbentuk, dan 2) estimasi efisiensi transformasi melalui Polymerase Chain Reaction(PCR) direct. Hasil penelitian dianalisis dengan mengidentifikasi jumlah kalus yang terbentuk dan frekuensi transforman hasil PCR direct dengan visualisasi pita DNA menggunakan elektroforesis dan alat chemidoc. Hasil menunjukkan bahwa estimasi efisiensi transformasi pCAMBIA5300 cryIAb-cryIAc dengan bantuan Agrobacteriumtumefaciens strain GV3101 cukup efektif dalam pembentukan tanaman transgenik padivarietas Inpari 6. Kerapatan sel bakteri 0,1 paling efisien terhadap efisiensi transformasi, dengan persentase sebesar 2,56%. Hasil deteksi keberadaan gen fusicryIAb-cryIAc di dalam tanaman transgenik dan kalus stadia akhir transformasi padiInpari 6 dengan PCR direct sebesar 5,84%.