Seleksi dan pemurnian bakteri proteolitik isolat HTcUM3-9 dari tauco Pasar Besar Kota Malang untuk isolasi kolagen dari sisik ikan bandeng / Fira Fatma
| Main Author: | Fatma, Fira |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed |
| Terbitan: |
, 2017
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.um.ac.id/23956/ |
Daftar Isi:
- ABSTRAKFatmaF.2017.SeleksidanPemurnianBakteriProteolitikIsolatHTcUM3-9dariTaucoPasarBesarKotaMalanguntukIsolasiKolagendariSisikIkanBandeng.SkripsiJurusanKimiaFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasNegeriMalang.Pembimbing(I)Dr.EviSusantiS.Si.M.Si.(II)Dr.SuhartiS.Pd.M.Si.KatakuncikolagenproteaseisolatHTcUM3-9.Kolagendapatdiisolasidenganmenggunakanmetodeenzimatis.Metodeenzimatisbersifatselektifdalammemutuskanikatanpeptidapadaproteinsehinggarendemenkolagenyangdihasilkantinggi.Enzimyangdigunakanolehprodusenkolagenselamainiadalahenzimproteaseporcinepepsinkarenaharganyasangatmurah.PorcinepepsinberasaldarilambungbabisehinggatidakhalalbagiumatIslam.Alternatifproteasedarisumberlainperludicariuntukmengatasimasalahinisalahsatunyadaribakteri.DuapuluhisolatbakteriproteolitikdaritaucoPasarBesarKotaMalangtelahdiisolasi.EmpatisolattelahdimurnikanyaituHTcUM2HTcUM6.2.1HTcUM6.2.2danHTcUM10dengannilaiindeksproteolitikmasing-masing272724dan30sedangkanenambelasisolatlainnyabelumdimurnikandanbelumdiketahuinilaiindeksproteolitiknyasehinggabelumdiketahuiisolatpotensialdaritaucoyangmenghasilkanproteasedenganaktivitastinggi.Penelitianinibertujuanuntuk(1)memperolehisolatHTcUMmurniyangpotensialsebagaibakteriproteolitikdan(2)mengetahuikemampuanenzimproteaseyangdihasilkanisolatHTcUMpotensialtersebutuntukisolasikolagendarisisikikanbandeng.Penelitianinimerupakanpenelitiandeskriptiflaboratorisyangdilakukanmelaluibeberapatahapyaitu(1)seleksiisolatbakteriproteolitikberdasarkannilaiindeksproteolitikyangdiperolehdarikulturhasilpengencerandenganmetodesebar(2)pemurniankandidatisolatbakteripotensialdenganmetodesebardilanjutkanmetodegoresyangdiujikemurniannyamelaluipewarnaanGram(3)konfirmasinilaiindeksproteolitikisolatmurniuntukmenentukanisolatyangmemilikiindeksproteolitiktertinggisebagaiisolatpotensial(4)produksiekstrakkasarproteaseisolatpotensial(5)ujiaktivitasproteasedenganmetodeAnson(6)ujikemampuanproteaseuntukisolasikolagendarisisikikanbandengberdasarkanbesarnyapeningkatankadarproteinpadareaksienzimatisantarasisikikanbandengdenganproteasedibandingkankontrolmenggunakanmetodeLowry.SembilanisolatbakteriproteolitikHTcUM3-9telahdiseleksidandiperolehempatkandidatisolatpotensialdengannilaiindeksproteolitik88052yaituHTcUM6.1.1HTcUM7.1HTcUM8danHTcUM9.1.Empatkandidatisolatpotensialdimurnikandandikonfirmasinilaiindeksproteolitiknyadengannilaiberturut-turut272433dan23.IsolatHTcUM8dengannilaiindeksproteolitiktertinggidipilihsebagaiisolatmurniyangpotensialsebagaibakteriproteolitik.EnzimproteaseisolatHTcUM8yangdiproduksipadamediadengansumbernitrogenpeptonmenghasilkanaktivitasenzimsebesar0347U/mLtidakmampumengisolasikolagendarisisikikanbandengsedangkanpadalimbahcairtahusebesar0167U/mLmampumengisolasikolagendarisisikikanbandeng.ABSTRACTFatmaF.2017.SelectionandPurificationofproteolyticbacteriaisolatesHTcUM3-9ofTaucoBigMarketMalangforIsolationofCollagenfromFishScalemilkfish.UndergraduateDepartmentofChemistryFacultyofMathematicsandNaturalSciencesStateUniversityofMalang.Supervisor(I)Dr.EviSusantiS.Si.M.Sc.(II)Dr.SuhartiS.Pd.M.Sc.KeywordscollagenproteaseisolatesHTcUM3-9.Collagencanbeisolatedbyenzymaticmethods.Theenzymaticmethodisselectiveinbreakingthepeptidebondintheproteinresultinginhighyieldofcollagen.Theenzymeusedbycollagenproducerssofarisproteaseenzymeporcinepepsinbecausethepriceisverycheap.PorcinepepsincomesfromporkstomachsoitisnotlawfulforMuslims.Alternativeproteasesfromothersourcesneedtobesoughttoaddressthisproblemoneofthemfrombacteria.TwentyisolatesofproteolyticbacteriafromtaucoBigMarketMalanghavebeenisolated.FourisolateshavebeenpurifiednamelyHTcUM2HTcUM6.2.1HTcUM6.2.2andHTcUM10withproteolyticindexvaluesof2.72.72.4and3.0whiletheothersixteenisolateshavenotbeenpurifiedandthevalueoftheproteolyticindexhasnotbeenidentifiedsothereisnoknownpotentialisolatesfromtaucothatproducehighactivityproteases.Thisstudyaimsto(1)obtainpotentiallypureHTcUMisolatesasproteolyticbacteriaand(2)knowtheabilityofproteaseenzymesproducedbypotentialHTcUMisolatestoisolatecollagenfrommilkfishscales.Thisresearchisalaboratorydescriptiveresearchdonethroughseveralstages(1)selectionofisolatesofproteolyticbacteriabasedonthevalueofproteolyticindexobtainedfromthecultureofdilutionresultswiththescattermethod(2)purificationofcandidatepotentialbacterialisolatesbyscattermethodfollowedbyscratchmethodtestedpuritybyGramstaining(3)confirmationofproteolyticisolateindexvaluetodetermineisolatehavinghighestproteolyticindexaspotentialisolate(4)productionofcrudeextractofproteasepotentialisolates(5)testofproteaseactivitywithAnsonmethod(6)proteaseabilitytestforcollagenisolationfrommilkfishscalebasedontheamountofproteinincreaseinenzymaticreactionbetweenmilkfishscalesandproteasecomparedtocontrolusingLowrymethod.NineisolatesofproteolyticbacteriaHTcUM3-9havebeenselectedandobtainedfourpotentialisolatecandidateswithproteolyticindexvalues88052isHTcUM6.1.1HTcUM7.1HTcUM8andHTcUM9.1.Fourpotentialisolatecandidateswerepurifiedandconfirmedtheirproteolyticindexvalueswithconsecutivevaluesof2.72.43.3and2.3.TheHTcUM8isolateswiththehighestproteolyticindexvalueswereselectedaspotentialpureisolatesasproteolyticbacteria.HTcUM8isolateproteaseenzymeproducedonmediawithpeptonenitrogensourceproducesenzymeactivityof0.347U/mLunabletoisolatecollagenfrommilkfishscaleswhereasintofuliquidwasteof0.167U/mLcanisolatecollagenfrommilkfishscales.