Pemurnian ekstrak kasar sistem selulase bacillus circulans dengan metoda fraksinasi amonium sulfat mengunakan fraksi 0-30%,30-60%, dan 60-100% / Alfifi Agustina
| Main Author: | Agustina, Alfifi |
|---|---|
| Format: | Thesis NonPeerReviewed |
| Terbitan: |
, 2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: |
http://repository.um.ac.id/23609/ |
Daftar Isi:
- KatakuncipemurnianBacilluscirculanssistemselulasefraksinasiamoniumsulfatSelulaseadalahenzimyangmenghidrolisisselulosamenjadiglukosadengancaramemutusikatan(946185944)glikosidik.SistemSelulasemerupakansekumpulanselulaseyangmempunyaitipeaktivitasberbeda.Ekstrakkasarsistemselulasesecaraumummasihmemilikiaktivitasyangrendahdanmudahmengalamipenurunanaktivitasselamapenyimpanankarenamasihbercampurdenganproteinlain.Penggunaansistemselulasediindustrikhususnyauntukproduksibioetanolmemerlukanselulasedenganaktivitastinggidanstabil.Olehkarenaituperludilakukanpemurnianekstrakkasarsalahsatumetodapemurnianproteinyangmurahdansederhanaadalahfraksinasiamoniumsulfat.Penelitianinibertujuanuntuk(1)mengetahuiaktivitasspesifikfraksisistemselulaseyangdihasilkandaripemurnianekstrakkasarselulasedenganfraksinasiamoniumsulfatmenggunakanfraksi0-30%30-60%dan60-100%(2)pengaruhsuhuselamapemurnianterhadapaktivitasspesifiksistemselulaseyangdihasilkanserta(3)waktudankonsentrasisubstratoptimumpadareaksienzimatisyangdilakukanolehfraksidenganaktifitasspesifiktertinggi.PenelitianinibersifatlaboratorisdilakukandiLaboratoriumKimiaFMIPAUMyangterdiridaribeberapatahapyaitu(1)produksiekstrakkasarselulasedariBacilluscirculansstrainlokaldalammediaBergpadapH90suhu500Cdanwaktuinkubasi5hari(2)penentuanaktifitasspesifikfraksihasilpemurnianekstrakkasardenganmetodafraksinasiamoniumsulfatdengantingkatkejenuhan0-30%30-60%60-100%(3)penentuanpengaruhsuhukamardansuhu4Cterhadapaktifitasspesifikfraksihasilpemurnian(4)karakterisasifraksidenganaktivitasspesifiktertinggi.AktivitassistemselulaseditentukanmelaluiaktivitasavicelasedanCMCase.Keduaaktivitasditentukanberdasarkanatasjumlahglukosayangdihasilkansetelahproseshidrolisis.KadarglukosaditentukandenganmetodaspektrofotometrisinartampakSomogy-Nelson.KadarproteinditentukandenganmetodaLowry.Aktivitasspesifikadalahunitaktivitasenzimpermgprotein.Hasilpenelitianmenunjukkanbahwa(1)Aktivitasspesifikhasilpemurnianekstrakkasarselulasedenganfraksinasiamoniumsulfat0-30%30-60%dan60-100%yaituCMCasemasing-masing53791651215071U/mgdanavicelasemasing-masing240173389762U/mg.(2)Aktivitasspesifikfraksisistemselulaseyangdimurnikanpadasuhu4Clebihtinggidibandingkansuhukamar.AktivitasspesifikCMCasepadasuhukamar16512U/mgmenjadi24294U/mgpadasuhu4C(naik4836%).AktivitasspesifikAvicelasepadasuhukamar7338U/mgmenjadi11391U/mgpadasuhu4C(naik8091%)(3)Fraksisistemselulasetermurnikan(30-60%)memilikiwaktuoptimumreaksiiienzimatisselama3jamdengankonsentrasisubstratoptimum15%(b/v)memilikiaktivitasspesifikCMCase29951U/mgdanavicelase23719U/mg.